顯微計數法不溶性微粒儀的操作規程

顯微計數法是將一定體積的供試液濾過，使所含不溶性微粒截留在微孔濾膜上，在100倍顯微鏡下，用經標定的目鏡測微尺分別測定其最長直徑在10μm以上（≥10um）和25μm以上（≥25um）的微粒，根據過濾面積上的微粒總數，計算出被檢測的供試液每1ml（或每個容器）中含不溶性微粒的數量,這就是顯微計數法不溶性微粒儀操作的原理。

1.顯微計數法不溶性微粒儀操作的實驗環境、儀器和用具

(1) 實驗環境 顯微計數法不溶性微粒儀的實驗操作所處環境應不得引入外來微粒，可以在超凈室、層流凈化臺或能符合要求的潔凈實驗室中進行。玻璃儀器和其他所需的用品都應潔凈。顯微計數法所用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑），使用前須經不大于1.0μm的微孔濾膜濾過。

(2) 顯微鏡 雙筒大視野顯微鏡，目鏡內附標定的測微尺（每格5～10um）。坐標軸前后、左右移動范圍均應大于30mm，顯微鏡裝置內附有光線投射角度、光強度均可調節的照明裝置。檢測時放大100倍。

(3) 鏡臺測微尺（用于目鏡測微尺的標定）。

微孔濾膜 白色，孔徑0.45μm、直徑25mm（或13mm），一面印有間隔3mm的格柵；膜上如有10μm以上（≥10um）的不溶性微粒，應在5粒以下，并不得有25μm以上（≥25um）的微粒，必要時，可用微粒檢查用水沖洗使符合要求。

(4) 直徑25mm（或13mm）夾式定量濾器。

(5) 平皿。

(6) 平頭無齒鑷子。

(7) 計數碼器。

2 .顯微計數法不溶性微粒儀的操作方法

(1) 供試品檢查前的準備

(2) 取50ml微粒檢查用水（或其他溶劑），經微孔濾膜（一般孔徑為0.45μm）濾過，置于潔凈的適宜容器中，旋轉使可能存在的微粒均勻，靜置待氣泡消失。按顯微計數法項下的檢查法檢查，每50ml中含10μm以上（≥10um）的不溶性微粒應在20粒以下，含25μm以上（≥25um）的不溶性微粒應在5粒以下。否則表明微粒檢查用水（或其他溶劑）、玻璃儀器和實驗環境不適于進行微粒檢查，應重新進行處理，檢測符合規定后放可進行供試品檢查。

(3) 用水沖洗平皿，再用凈化水反復沖洗，瀝干，置實驗環境中備用。

(4) 在凈化臺上，將濾器用凈化水沖洗至潔凈，用平頭無齒鑷子夾取2.4項下符合要求的測定用微孔濾膜置濾器托架上，用濾器夾固定濾器，倒置，反復用凈化水沖洗濾器內壁，瀝干后安裝在抽濾瓶上備用。

(5) 待檢樣品應事先除去外包裝，并用凈化水將容器外壁沖洗干凈，置適宜實驗環境中備用。

(6) 檢查法

標示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液 除另有規定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺上小心翻轉20次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法

(7) 抽取或量取供試品溶液25ml，沿濾器內壁緩緩注入經預處理的濾器（濾膜直徑25mm）中，靜置1分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25ml，沿濾器內壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干，然后用平頭無齒鑷子將濾膜移置平皿上（必要時，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整），微啟蓋子使濾膜干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺上。調好入射光，放大100倍進行顯微測量，，調節顯微鏡至濾膜格柵清晰。移動坐標軸，分別檢測有效過濾面積上最長粒徑在大于10μm（≥10um）和25μm以上（≥25um）的微粒數。另取至少兩個供試品，同法測定，計算測定結果的平均值。

(8) 標示裝量為25ml以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液 除另有規定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺上小心翻轉20次，使混合均勻。，立即小心開啟容器，用適宜的方法直接抽取容器中的全部溶液，沿濾器內壁緩緩注入濾器（濾膜直徑13mm）中，照上述3.2.1同法測定。

(9) 靜脈注射用無菌粉末及供注射用無菌原料藥 除另有規定外，照光阻法檢查法3.2.3或制備供試品溶液，同3（2）操作測定。

3 顯微計數法不溶性微粒儀的記錄與計算

(1) 記錄 顯微計數法不溶性微粒儀的記錄應包括所用儀器型號；供試品包裝情況，檢驗數量；測定用濾膜處理前后微粒水平，微粒檢查用水來源或制備情況與含微粒數。

(2) 計算 用手撳計數碼器分別統計濾膜上直徑10μm以上（≥10um）的微粒數，以及25μm以上（≥25um）的微粒數，計算，即得每1ml供試品溶液（或每個容器或每份供試品）中所含10μm以上（≥10um）和25μm以上（≥25um）的不溶性微粒數。

4 .顯微計數法不溶性微粒儀的注意事項

(1) 各種形狀的微粒應以實測到的最長粒徑計算，重疊微粒和聚合膠體微粒均以單個微粒計數；結晶析出不屬于檢測范圍，故不應計算。

(2) 必要時另取微粒檢查用水（或其他溶劑）25ml照3.2.1項下自“沿濾器內壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干”起，依法操作，此項空白試驗僅可視作對操作環境、實驗用具的認證，所得數據不必在供試品檢查結果中扣除，但對檢測結果的正確與否有密切關系。此項試驗必須檢測全濾膜，達到3（1）的要求后方可進行樣品檢測。

(3) 顯微計數法不溶性微粒儀檢測法不適用于乳液型和混懸型注射劑，對于黏度過高者，光阻法和本法均無法測定時，可用適宜的溶劑經適量稀釋后測定。

(4) 供試品的檢查數量：為確保檢查結果具有統計學意義，除另有規定外，一般應取供試品3瓶（支）以上進行不溶性微粒檢查。

5 .顯微計數法不溶性微粒儀的結果與判定

(1) 標示裝量為100ml或100ml以上的靜脈用注射液 除另有規定外，每1ml中含10μm以上（≥10um）的微粒不超過12粒，含25μm以上（≥25um）的微粒不超過2粒，判為符合規定。

(2) 標示裝量為100ml以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料 除另有規定外，每個供試品容器中含10μm以上（≥10um）的微粒不超過3000粒，含25μm以上（≥25um）的微粒不超過300粒，判為符合規定。

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